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检测背景
对于宿主细胞蛋白(Host Cell Protein,HCP)残留的检测，双抗夹心ELISA法仍是目前HCP残留检测的金标准方法。然而，这种方法高度依赖于试剂盒中HCP抗体对于总宿主细胞蛋白的覆盖率。若ELSA检测中使用的抗体覆盖率不足，可能在最终产品中漏检某些残留的HCP，进而产生药物在患者体中引起免疫反应和其他药物安全性问题的风险，所以各国药典中均要求对HCP抗体的覆盖率进行验证。
君研生物针对客户提供的样品，包括哺乳动物细胞(CHO、Vero等)、酵母细胞(汉逊酵母、酿酒酵母、毕赤酵母等)、大肠杆菌以及其他工程细胞的宿主细胞蛋白样品，使用AAE-MS的方法，评估其对应抗体的覆盖率。
检测原理（AAE-MS法）
抗体亲和富集(Antibody Afhnity Extraction,AAE)，首先将抗HCP抗体偶联到磁珠上，然后上样HCP样品,富集过程中HCP抗体可捕获识别HCP，而未识别的HCP则被流穿，通过多次重复循环，直到没有额外的HCP结合为止;最后通过低pH等条件洗脱、富集HCP。将富集前的HCP和富集后HCP进行高分辨质谱分析(LC-MS)，计算抗体的覆盖率。抗体亲和富集与质谱联用(AAE-MS)可以数字化分析覆盖率，同时可以鉴定单个HCP蛋白的身份信息，有助于决定检测结果是否适合于工艺监测和产品批次放行。
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